MDHS-0004 支原体分型检测

一、服务简介

      支原体是细胞污染物中比较常见的一种，细胞受支原体污染程度较轻时，不会表现出明显的症状，但一旦这种潜伏的污染爆发时，细胞培养液会变浑浊。原代细胞和传代细胞都可能遭受支原体污染，根据国外不同实验室的调查结果显示，有15%-80%的细胞系被支原体污染，传代细胞的污染率高于原代细胞。

      细胞系是生物医学研究中重要的工具，在细胞质量控制相关的问题中，细胞系交叉污染和微生物支原体污染是其中常见的质量问题。交叉污染分为种属间的交叉污染、种内不同细胞系的交叉污染。2002年(Drexler et al., 2002)对440个白血病-淋巴细胞系进行分析后发现，只有64%的细胞身份正确且支原体阴性，在交叉污染的细胞系中有50%为支原体阳性，23%的真实细胞系也有支原体阳性。

      目前行业基本都是对细胞或细胞制品进行质控是否有支原体污染，而对具体污染的什么种类支原体很少做探究。从质量管理体系的角度来说，如果能够进一步弄清楚污染的支原体种类，有利于支原体污染溯源，通过分析污染来源及可能途径，进一步完善质量体系，加强管控，降低支原体污染的发生概率。

      我公司CELL STR ID®支原体分型检测体系,在充分分析各类支原体的16SDNA序列基础上,设计了针对支原体的特异引物探针，同时通过不同支原体的特异片段长度差异进行区分。为了实现这一目的，利用多重荧光PCR和毛细管电泳技术，实现对支原体的高灵敏度检测及不同种类的支原体进行有效区分。

二、服务内容

（一）服务流程

（二）服务特点

      1．采用多重荧光PCR支原体扩增试剂盒进行多重扩增；扩增产物经ABI3130XL基因分析仪进行检测。

      2．灵敏度高。可以鉴别细胞样本中含有的少量支原体污染，检测线为皮克级：30pg/μL。

      3．检测结果不仅可以是否有无支原体污染，同时可知其中8种支原体是那种支原体污染；随着科研技术的发展，根据需要单独列出的支原体会有所增加。

      4．鉴定报告中文版或中英版（自选），以及图谱（见支原体分型检测图谱）。

（三）注意事项

      1．样品寄送：用户提供DNA或细胞 样本，加冰袋运输；同时请注明细胞数量或DNA含量，DNA 含量大于50ng/μl，体积大于20μl。如提供细胞，请提供PBS细胞悬浮液，离心沉淀，去上清液，可常温特快专递运输（京外客户推荐方法）；细胞数量≥10⁶个。

      2．正常检测周期5-7个工作日，加急2-3个工作日。

（四）结果交付

      检测结果以电子版的形式发放到订单或合同上面预留的邮箱，书面报告可根据需要随时提供，寄送到贵单位。

三、支原体分型检测图谱及参考文献 

参考文献：

4.1、Mycoplasma contamination of cell cultures: Incidence, sources, effects,detection, elimination, prevention。Cytotechnology 39: 75–90, 2002

4.2  Advances in PCR-based detection of mycoplasmas contaminating cell cultures. PCR Methods         Appl 4: 199–208     Rawadi G and Dussurget O (1995)