BY-0997 HB 9.6小鼠杂交瘤细胞系
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- 公司名称 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型号 BY-0997
- 产地
- 厂商性质 生产厂家
- 更新时间 2025/7/21 16:06:15
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HB 9.6小鼠杂交瘤细胞系
HB 9.6小鼠杂交瘤细胞系是单克隆抗体制备与免疫检测领域的重要细胞模型，凭借稳定分泌特异性抗体、良好的体外培养性能及精准的抗原识别能力，在生物分子检测、疾病诊断试剂研发及免疫学基础研究中应用广泛，为单克隆抗体的规模化生产与功能研究提供了可靠载体。
来源与背景：该细胞系源于 BALB/c 小鼠脾脏 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合产物，通过经典杂交瘤技术筛选克隆获得。其建立过程是将经特定抗原免疫后的 B 淋巴细胞与永生化骨髓瘤细胞融合，利用 HAT 培养基筛选出成功融合的杂交瘤细胞，再经有限稀释法克隆和抗体特异性检测，最终得到能稳定分泌针对目标抗原的单克隆抗体的细胞株。这一过程有效解决了多克隆抗体成分复杂、特异性不足、批间差异大的问题，为获取均一性高、靶向性强的抗体提供了稳定来源，自建立以来，在多种免疫检测方法的建立中发挥了重要作用。
细胞特性：形态上呈现典型的杂交瘤细胞特征，贴壁生长时呈上皮样多边形，细胞质丰富，细胞核大而圆，核质比约 1:2.3，约 5% 的细胞可见双核结构，体现融合细胞的形态特点。核心特性显著：抗体分泌稳定高效，分泌量达 8-14μg/10?细胞 / 24h，连续传代 58 次后，抗体分泌能力仅下降 8%，稳定性优于多数同类细胞系；抗原结合特异性高，与靶抗原的结合常数（Kd）达 10??M 级别，与同源抗原的交叉反应率低于 0.9%，确保了检测结果的准确性；增殖能力稳健，体外培养倍增时间约 51-57 小时，克隆形成率 40%，腹腔接种 BALB/c 小鼠后，12-18 天可形成腹水，腹水中抗体浓度达 3-7mg/ml，便于批量制备抗体。传代时采用常规方法处理，传代比例 1:3-1:4，当细胞密度达到 70%-75% 时需及时传代，过度密集会导致抗体分泌量下降 15% 左右。
培养条件：适宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培养基，添加 1% 抗生素，培养环境控制在 37℃、5% CO?饱和湿度。关键培养要点：血清质量关键，需使用低内毒素胎牛血清（<0.3EU/ml），劣质血清会使细胞活力降低 24%，抗体分泌量减少 30%；无血清培养适配性较好，在无血清培养基中添加适量的胰岛素、转铁蛋白等营养因子，可维持细胞正常生长，且抗体纯度能提高至 93% 以上，有利于后续的抗体纯化；腹水制备规范，小鼠腹腔预先注射降植烷，7 天后接种 1.1×10?个细胞，13-19 天收集腹水，每只小鼠可收获 2-5ml 腹水，腹水经纯化后抗体活性保持稳定。冻存采用含 10% DMSO 的胎牛血清冻存液，程序降温后液氮保存，复苏后 48 小时贴壁率达 78%，抗体分泌功能恢复 83% 以上。
检测鉴定：经严格的微生物检测，无细菌、真菌、支原体污染，符合杂交瘤细胞的质量标准。抗体亚型鉴定为 IgG2a 型，轻链为 κ 型；通过 ELISA、免疫印迹等方法验证，该抗体能特异性结合靶抗原，无明显交叉反应；染色体核型分析显示，其染色体数目为 83-93 条，融合了亲本 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞的染色体特征，符合杂交瘤细胞的遗传学特性；功能验证中，将该抗体用于免疫组化检测时，能特异性识别组织中的靶抗原，阳性信号清晰，背景干扰低，证实其在免疫检测中的实用性。
应用领域：在生物分子检测方面，基于该细胞系分泌的抗体构建的 ELISA 试剂盒，检测灵敏度达 0.45ng/ml，线性范围宽，适用于血清、组织等多种样本类型中靶抗原的定量分析；在疾病诊断试剂研发中，利用该抗体开发的免疫荧光探针，可用于病理切片中靶抗原的可视化检测，诊断符合率达 89%。在免疫学研究中，可用于抗原表位分析，通过肽扫描实验确定抗原的特异性结合区域，为疫苗设计提供关键信息。此外，该细胞系可用于优化抗体生产工艺，通过调整悬浮培养的温度、pH 值等条件，能使抗体产量提升 1.3-1.9 倍，有助于降低抗体规模化生产的成本，为免疫检测技术的发展及相关疾病的精准诊断提供了重要支持。
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