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BY-0087 Hep-2人喉癌上皮细胞系

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Hep-2人喉癌上皮细胞系

Hep-2人喉癌上皮细胞系是研究喉鳞状细胞癌的经典模型,因具备典型的上皮源性恶性表型及稳定的增殖特性,在喉癌发病机制、侵袭转移及药物敏感性研究中应用广泛,为解析喉癌从上皮异型增生到恶性浸润的演化过程提供了可靠实验工具,是喉癌基础研究与临床转化的重要桥梁。

来源与背景:该细胞系于 1954 年从一名 56 岁男性喉鳞状细胞癌患者的原发肿瘤组织中分离建立,是首ge被稳定传代的喉癌上皮细胞系。与转移灶来源的肿瘤细胞系不同,其保留了原发喉癌的上皮组织学特征,尤其适合研究喉癌发生的早期分子事件。作为喉癌研究中使用zui广泛的模型之一,其长期传代后仍保持稳定的遗传学特征,为不同实验室的结果比对提供了标准化平台,弥补了原代喉癌组织样本稀缺且体外存活时间短的缺陷,至今仍是喉癌基础研究的标gan细胞系。
细胞特性:形态上呈现典型的上皮样特征,多角形或不规则形贴壁生长,细胞排列呈铺路石样,边界清晰,细胞质丰富,可见角质颗粒(鳞状上皮分化标志),细胞核大而圆,核仁明显,核质比达 1:1.5,显著高于正常喉上皮细胞。核心特性体现为强增殖活性,体外培养时倍增时间约 48-60 小时,克隆形成率达 70%,显著高于低恶性度的头颈部肿瘤细胞系,裸鼠皮下接种后 3-4 周即可形成实体瘤,成瘤率达 100%,模拟临床喉癌的快速生长特性;鳞状上皮标志物表达,高表达细胞角蛋白 5/6(CK5/6)、CK14,部分表达 p63,符合喉鳞状上皮的分化特征,而正常喉上皮细胞高表达的 CK13 表达显著下调,反映其恶性转化后的表型改变;中度侵袭能力,体外 Transwell 实验中穿透基质膜的细胞数是正常喉上皮细胞的 8-10 倍,能分泌基质金属蛋白酶(MMP-1、MMP-3),可降解喉黏膜基底膜成分,模拟喉癌局部浸润过程。传代时采用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化,因细胞连接紧密,需消化 3-5 分钟,传代比例 1:3-1:5,连续传代 50 次后仍保持上皮形态及增殖活性,但角质化特征可能略有减弱。
培养条件:适宜采用含 10% 胎牛血清的 MEM 培养基,添加 1% 非必需氨基酸和 1% 抗菌混合液以维持上皮细胞特性。培养环境需控制在 37℃、5% CO?饱和湿度,每 2-3 天更换一次培养基,细胞密度维持在 30%-70% 之间,过度汇合会导致细胞接触抑制,增殖速率下降 20%-30%。与其他上皮细胞系相比,其对钙离子浓度敏感,培养基中钙离子需维持在 1.8mM,过低会导致细胞形态变圆,失去上皮极性,传代时消化后需用含血清培养基终止反应,以保护细胞表面黏附分子,冻存液推荐含 10% DMSO 的胎牛血清,复苏后存活率可达 80% 以上,复苏后 24 小时贴壁率超过 90%。
检测鉴定:经微生物筛查,无支原体、细菌、真菌及常见病毒污染,符合实验细胞质量标准。免疫细胞化学检测显示,CK5/6、p63 呈强阳性表达,上皮膜抗原(EMA)阳性,波形蛋白(vimentin)阴性,明确其上皮源性特征。染色体核型分析呈现亚四倍体核型,存在 7 号、11 号染色体三体及 13 号染色体缺失等异常,与 60% 的喉鳞状细胞癌患者的遗传学改变吻合。功能验证实验中,经表皮生长因子(EGF)处理后,细胞增殖速率提升 40%,EGFR 磷酸化水平升高,证实其对生长因子信号的依赖性,与临床喉癌中 EGFR 高表达的特征一致。
应用领域:在发病机制研究中,该细胞系被用于揭示喉癌发生的分子机制,研究发现其 p53 基因存在热点突变,导致细胞周期检查点失控,同时 HPV 阴性(与多数喉癌临床样本一致),排除病毒干扰,更适合研究非病毒相关喉癌的发生机制。在药物筛选领域,其对shun铂等喉癌常用治疗药物的敏感性与临床样本高度相关,IC50 值约 2.5μM,常被用于评估新型hua疗药物及靶向药物的疗效,近期研究发现 EGFR 抑制剂可显著抑制其增殖,联合放疗具有协同效应。在侵袭机制研究中,通过沉默 MMP-1 基因发现,其穿透基底膜的能力下降 60%,证实 MMP-1 在喉癌浸润中的关键作用,为开发抗侵袭治疗提供潜在靶点。
与其他头颈部肿瘤细胞系(如 FaDu)的对比显示,Hep-2 更特异表达喉鳞状上皮标志物(如 CK14 阳性率 90% vs 65%),更适合研究喉癌te有的生物学行为。其稳定的上皮表型及明确的遗传学特征,使其在喉癌早期诊断标志物筛选及治疗方案优化中具有不可替代的价值,为喉癌的精准诊疗提供了从实验室到临床的重要参考。

以上信息仅供参考,详细信息请联系我们。



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