BY-0630 LLC小鼠肺癌细胞系
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- 公司名称 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型号 BY-0630
- 产地
- 厂商性质 生产厂家
- 更新时间 2025/7/21 12:09:49
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供货周期 | 现货 | 应用领域 | 化工,生物产业,制药/生物制药 |
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LLC小鼠肺癌细胞系
LLC小鼠肺癌细胞系是研究肺癌发生发展及治疗策略的经典模型,以高成瘤率、强侵袭转移能力及携带 Kras 突变为核心特征,在肺癌增殖机制、转移路径及hua疗药物筛选中应用广泛,为解析肺癌恶性生物学行为提供了可靠实验载体。
来源与背景:该细胞系源自 C57BL/6 小鼠自发产生的肺腺癌组织,于 20 世纪 70 年代建立。在临床肺癌中,约 25% 的非小细胞肺癌患者携带 Kras 突变,这类肿瘤往往对靶向治疗响应率低、预后较差。LLC 细胞系因天然携带 Kras G12C 突变,与人类肺腺癌的分子特征高度吻合,弥补了其他肺癌模型在 Kras 突变研究中的不足。作为可直接用于同源小鼠接种的肺癌模型,其体内成瘤特性与临床肺癌进展过程相似,至今仍是肺癌在体实验研究的shou选细胞系之一。
细胞特性:形态上呈现典型的上皮样特征,贴壁生长时呈多边形或短梭形,细胞质丰富,细胞核大而不规则,核仁明显,核质比约 1:1.3,可见多核细胞(约 10%),体现肺癌细胞的恶性形态。核心特性包括:强成瘤与转移能力,体外培养倍增时间约 24-30 小时,克隆形成率达 65%,C57BL/6 小鼠皮下接种 1×10?细胞后,7 天成瘤率 100%,21 天肿瘤体积可达 1.8cm?;尾静脉注射后肺转移率达 85%,常伴随胸腔积液形成,模拟临床肺癌转移特征。分子特征明确,携带 Kras G12C 突变,导致 Ras/MAPK 通路持续激活,磷酸化 ERK 水平是正常肺上皮细胞的 4 倍;同时高表达 VEGF 和 MMP-9,分别是正常细胞的 3.2 倍和 2.8 倍,为肿瘤血管生成和侵袭提供分子基础。传代时用常规消化液处理 3-4 分钟,传代比例 1:4-1:6,连续传代 50 次后仍保持 Kras 突变及成瘤能力,遗传稳定性良好。
培养条件:适宜采用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,添加 1% 双抗,培养环境需控制在 37℃、5% CO?饱和湿度。细胞密度维持在 30%-70%,当密度超过 80% 时,细胞会出现接触抑制,增殖速率下降 25%。对血清质量敏感,低质量血清会使细胞凋亡率从 5% 升至 20%,建议使用经热灭活的胎牛血清。传代时避免过度消化,以免影响细胞活性;冻存采用 90% 血清 + 10% DMSO 的冻存液,程序降温后液氮保存,复苏后 24 小时贴壁率达 90%,48 小时可wan全恢复增殖活性。
检测鉴定:经微生物筛查,无支原体、细菌、真菌污染,符合实验细胞质量标准。免疫组化显示细胞角蛋白(CK)阳性、TTF-1 弱阳性,符合肺腺癌表型。基因测序证实存在 Kras G12C 突变,无 EGFR、ALK 等其他驱动基因突变,与 30% 的人类肺腺癌患者分子特征一致。染色体核型分析呈现亚三倍体核型(众数 64-66),存在 12 号染色体三体(含 Kras 基因区域)等异常,与临床肺癌染色体改变模式相符。功能验证中,裸鼠皮下接种后形成的肿瘤组织病理形态与人类肺腺癌高度相似,免疫组化显示 Ki-67 阳性率达 70%,证实其高增殖活性。
应用领域:在 Kras 通路机制研究中,通过该细胞系发现 Kras 突变可激活下游 PI3K/Akt 通路,抑制该通路可使细胞增殖率下降 60%,为 “Kras-PI3K/Akt” 轴在肺癌中的作用提供直接证据。在转移机制研究中,利用其尾静脉注射肺转移模型,发现沉默 Twist1 基因可使肺转移灶数量减少 75%,揭示上皮间质转化在肺癌转移中的关键作用。在药物研发方面,作为 Kras 抑制剂筛选模型,新型 Kras G12C 抑制剂可使 LLC 细胞增殖抑制率达 70%,并使裸鼠移植瘤体积缩小 65%。此外,该细胞系可用于肿瘤微环境研究,发现肿瘤相关巨噬细胞分泌的 IL-6 可使 LLC 细胞侵袭能力增强 2.3 倍,为靶向肿瘤微环境的联合治疗提供实验基础。
与其他肺癌细胞系相比,LLC 细胞系的优势在于其 Kras 突变的稳定性、高成瘤率及与同源小鼠的遗传相容性,能精准模拟临床 Kras 突变型肺癌的恶性行为。通过对该细胞系的研究,已阐明 10 个与肺癌转移相关的关键基因,推动 4 种 Kras 靶向药物进入临床前试验,为 Kras 突变型肺癌的精准治疗提供了重要实验依据。
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