Invigentech IN0005 WB 超敏型ECL发光液产品介绍

Invigentech IN0005 WB 超敏型ECL发光液产品介绍

基础信息

产品概述

包装规格

提供 100ml 与 500ml 两种包装规格，满足不同实验规模需求。

储存条件

• 短期保存：4℃避光环境下，保质期可达 1 年；

• 长期保存：若暂不使用，建议 - 20℃避光冷冻保存；

• 运输条件：支持 4℃冷藏运输或室温运输。

产品描述

本试剂采用化学发光技术，专用于蛋白质或核酸类生物大分子的检测。生物大分子经电泳分离后，转移至印迹膜。针对蛋白质检测，采用一抗与辣根过氧化物酶（HRP）标记的二抗顺序结合目的蛋白；核酸检测则通过 HRP 标记探针直接或间接结合目的核酸。完成结合反应后，使用新鲜配制的 ECL 工作液，在室温避光条件下孵育印迹膜 2 - 3 分钟。后续既可通过 X 光片曝光显影，也可采用 CCD 扫描印迹膜，实现蛋白质或核酸条带的可视化检测。

操作说明

1. 完成      Western Blot 实验全流程，直至使用 PBST 或 TBS/TBST 充分洗涤二抗。

2.   配制 ECL 工作液：将 ECL Substrate A 液与 Peroxide Solution B 液按 1:1 体积比混合，现配现用。混合后的工作液室温放置数小时仍可使用，但灵敏度会有所下降。

3.   用平头镊子取出印迹膜，置于滤纸上沥干洗膜液，注意避免膜干燥。将 ECL 工作液均匀滴加于膜表面（使用量约 0.125 ml/cm?，可根据实验习惯调整），确保wan全覆盖，室温孵育 2 - 3 分钟。

4.   用镊子夹持印迹膜，弃去工作液，用吸水纸吸除多余液体。

5.   迅速将印迹膜夹在两层保鲜膜之间，尽量排除气泡。

6.   将包好的印迹膜蛋白面朝上，固定于 X 光胶片暗盒内。

7.   在暗室环境下，将 X 光片覆盖于膜上，根据预期信号强度设定曝光时间，完成显影、定影操作。

8.   可根据信号强弱调整曝光及显影时间，或通过多次曝光优化检测效果。

注意事项

1. 配制      ECL 工作液时，吸取 ECL Substrate A 液与 Peroxide Solution B 液需更换吸头，工作液配制后应立即使用。

2.   Peroxide Solution B 液含氧化剂，易被还原失效，使用后需及时密封保存。

3.   本产品仅适用于基于 HRP 酶标记抗体或核酸探针的检测系统。

4.   避免在同一洗膜盒内同时洗涤多张膜，防止膜间吸附、摩擦导致背景信号升高。

5.   选用高质量保鲜膜，劣质膜可能淬灭荧光或因杂质污染印迹膜，造成曝光背景值异常。

6.   根据目的蛋白表达丰度，合理设置曝光时间，避免因曝光不足或过长导致条带不清晰或背景过深。

7.   （NaN?）会抑制 HRP 活性，如需回收 HRP 标记探针或抗体，应避免使用 NaN?；若必须使用，其浓度不得超过 0.01%。

8.   建议进口抗体使用浓度：一抗 1:1000 - 1:4000，二抗 1:2000 - 1:5000。抗体浓度过高可能导致高背景或条带缺失。

9.   ECL Substrate A 液与 Peroxide Solution B 液具有生物毒性，操作时需穿戴实验服、佩戴一次性手套，避免接触皮肤或吸入。

特别声明：本产品仅限科研用途，严禁用于人体、动物实验或其他非科研领域。