细胞培养也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必须 的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。接下来了解在培养细胞的实验中常有的几种试剂:
1、高糖DMEM溶液: 用新配制的三蒸水配制,高糖DMEM干粉(规格10×1L),溶入约总量的1/3的三蒸水,并用水洗净包装袋,在磁力搅拌器上搅拌30分钟,加入NaHCO2 3.75克,补加水至最终量。用1N HCL调整PH为7.2,0.22μm滤膜抽滤除菌,分装-20℃保存,使用时加10%的胎牛血清及双抗溶液(最终浓度:青霉素100U/ml,链霉素 100μg/ml)
2、 胎牛血清: 使用前56℃水浴30分钟灭活,无菌条件下分装成10ml包装,-20℃保存。用时以10%浓度注入培养液中。
3、 青霉素、链霉素双抗溶液 青霉素100万单位及硫酸链霉素1g无菌条件下溶于消毒三蒸水10ml,分装,-20℃保存。使用时每1000ml培养液加入青、链霉素混合液1ml,最终浓度为青霉素100单位/ml,链霉素100μg/ml。
4、磷酸盐溶液(PBS): NaCl 8g, KCl 0.4g, NaHPO4.H2O 1.15g KH2PO4 0.2g 分别溶于1000ml三蒸水中,调节PH值至7.4高压蒸气灭菌,分装后4℃保存。
5、胰蛋白酶溶液: 用三蒸水制备成0.25%浓度,0.22μm滤膜抽滤除菌,4℃保存。
6、0.1%明胶溶液: 称取明胶粉剂0.1g于烧杯中,加入三蒸水100mL于50℃充分搅拌至其wang全溶解,0.22μm滤膜抽滤除菌,4℃保存。
免责声明
- 凡本网注明“来源:Ky开元集团”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-Ky开元集团合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:Ky开元集团”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
- 本网转载并注明自其他来源(非Ky开元集团)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
- 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。