Waters色谱柱在安装与使用时应注意什么？

Waters色谱柱使用注意事项如下：

1、安装与连接：

流向标识：

色谱柱通常标有流向箭头，需按箭头方向正确安装，避免反冲。

连接管路需与色谱柱接头匹配，避免因匹配不佳导致柱效下降或渗漏。

初始冲洗：

新色谱柱安装前，需用纯有机溶剂（如乙腈或甲醇）以低流速（0.1 mL/min）冲洗，再逐步提高流速至常规分析流速，以去除柱内杂质并避免气泡进入检测系统。

2、流动相与平衡

流动相兼容性：

更换流动相前，需确保新流动相与色谱柱内当前溶剂兼容。若流动相含缓冲盐，需先用5倍柱体积的水/有机溶剂混合液冲洗，再引入缓冲流动相。

避免流动相中盐浓度过高时直接使用高比例有机相，以防盐析出导致色谱柱堵塞。

平衡时间：

反相色谱柱需用至少10倍柱体积的流动相平衡，直至压力与基线稳定。

3、操作条件控制：

压力与流速：

避免压力急剧变化，调节流速时应缓慢进行。流速需根据色谱柱规格调整，避免超过色谱柱的*大允许压力。

温度管理：

避免温度循环变化，柱温升高可降低系统压力，但不宜通过提高柱温过度降低压力。

pH范围：

反相色谱柱推荐pH范围为1-12，但极*pH条件（如pH≥8）会加速键合相水解和硅胶溶解，需降低使用温度并缩短操作时间。

4、样品处理

样品净化：

样品中的杂质是色谱柱污染的主要来源。建议使用固相萃取（SPE）小柱或超临界流体萃取（SFE）系统对样品进行净化。

样品需用0.2 μm滤膜过滤，确保滤膜材料与样品溶剂兼容，避免滤膜溶解污染色谱柱。

溶剂选择：

样品溶剂需与流动相兼容，避免进样后发生沉淀或溶剂不互溶。建议使用流动相或比流动相洗脱强度弱的溶液溶解样品，以获得优异峰形和检测灵敏度。