TOMY高压灭菌器的高压灭菌效果验证的标准操作流程

TOMY高压灭菌器灭菌效果验证标准操作流程（SOP）

高压灭菌效果的验证是确保灭菌器性能可靠、灭菌过程符合国际标准（如ISO 17665、USP <1229>、EN 285等）的核心环节。TOMY高压灭菌器作为精密设备，其验证需通过物理监测、化学监测和生物监测三重手段，结合规范的装载方式与周期测试。以下是完整的标准操作流程：

一、验证前准备

1. 设备状态确认

• 检查灭菌器运行记录，确认近期无报警。

• 验证腔体密封圈完整性、排水滤网清洁度及安全阀校验有效期。

• 执行空载BD测试（Bowie-Dick Test），检测蒸汽穿透性和空气排除效果（每日运行前必需）。

2. 验证工具准备

• 标准纺织包：25cm×25cm×30cm，纯棉手术巾折叠，重量4.5kg±0.5kg。

• 管腔挑战包：内置1.5m长聚四氟乙烯管（内径2mm，外径4mm）。

• 选用嗜热脂肪地芽孢杆菌（Geobacillus stearothermophilus ATCC 7953），孢子浓度≥10? CFU/片。

• 一类：过程指示卡（贴于包裹外部）。

• 四类：多参数指示卡（贴于最难灭菌位置）。

• 五类：整合指示物（模拟生物指示剂响应）。

• 物理监测设备：温度/压力数据记录仪（需经计量校准，精度±0.5℃）。

• 化学指示物：

• 生物指示剂（BI）：

• 测试包：

二、物理监测流程（实时参数验证）

1. 温度-压力传感器布点

• 腔体排水口（冷点）。

• 灭菌物品几何中心。

• 蒸汽入口附近（热点）。

• 将多通道数据记录仪探头置于：

• 探头避免接触金属壁，确保蒸汽直接接触。

2. 程序运行与数据采集

• 所有点位≥121℃的持续时间≥设定灭菌时间（如20min）。

• 温度波动范围≤±1℃（灭菌阶段）。

• 压力与温度对应关系符合饱和蒸汽曲线（如121℃对应102.9kPa）。

• 选择待验证灭菌程序（如：121℃×20min，重力置换模式）。

• 启动灭菌循环，记录仪全程采集温度/压力数据，采样频率≥1次/10秒。

• 合格标准：

三、化学监测流程（过程指示验证）

1. 指示物放置

• 将五类化学指示物放入测试包中心及最难灭菌位置（如器械关节、管腔内部）。

• 一类指示卡贴于每个灭菌包裹外侧。

2. 结果判读

• 五类指示物：必须达到标定阈值（如黑色移至“ACCEPT”窗口）。

• 一类指示卡：均匀变为指定颜色（如米白色→深褐色）。

• 灭菌结束后，立即检查指示物颜色变化：

• 不合格处理：立即终止使用该批次物品，启动偏差调查。

四、生物监测流程（灭菌效力金标准）

1. 生物指示剂布点

• 将BI孢子条置于测试包中心及冷点区域（每灭菌柜至少3点）。

• 同步设置阳性对照（未灭菌BI）与阴性对照（已灭菌BI）。

2. 培养与结果判定

• 立即停用灭菌器，召回同批次物品。

• 执行灭菌故障调查（程序参数、装载方式、设备维护等）。

• 测试组BI：无颜色变化（紫色→黄色为阳性）。

• 阳性对照：必须显色。

• 阴性对照：无变化。

• 常规：48小时（快速检测型可缩至3小时）。

• 培养基：含溴甲酚紫的胰蛋白酶大豆肉汤（TSB）。

• 温度：56-60℃恒温培养。

• 培养条件：

• 培养周期：

• 合格标准：

• 失败处理：

五、装载方式验证（最大挑战测试）

1. 满载测试设计

• 使用标准测试包+实际物品混合装载，占据≥90%腔体容积。

• 模拟“最差情况”：金属器械密集区、织物吸湿区、管腔器械垂直放置。

2. 冷点定位与复测

• 通过物理监测确定满载冷点位置。

• 在冷点重复生物监测，确保FO值（致死率）≥60（即121℃等效灭菌时间≥60分钟）。

六、验证周期与记录

1. 周期性验证频率：

• 物理监测：每周。

• 生物监测：每月（医疗机构需每日或每锅）。

• 验证：新设备安装或大修后。

• 定期验证：

• 变更控制：程序参数、装载模式、物品类型变更时重新验证。

2. 文档管理：

• 记录所有监测数据（温度曲线、BI培养结果、化学指示物照片）。

• 生成验证报告，包含：设备编号、程序参数、测试日期、结果分析、签名审核。

七、验证失败处理流程

1. 立即停用灭菌器并张贴警示标识。

2. 检查物理监测数据，排除温度/压力异常。

3. 复核化学指示物与BI培养结果。

4. 排查设备故障（蒸汽质量、传感器校准、门密封性）。

5. 整改后执行3次连续空载+满载生物监测，全部合格方可重新启用。

八、注意事项

• 蒸汽质量要求：
  干燥度（≥97%）、非凝性气体（≤3.5%），定期检测蒸汽饱和度。

• 生物指示剂管理：
  避光冷藏（2-8℃），使用前平衡至室温，记录批号及有效期。

• 人员培训：
  操作员需通过灭菌原理、监测方法及应急处理考核。

总结：TOMY高压灭菌器的灭菌效果验证是一个系统化工程，需整合物理、化学、生物三重监测手段，结合科学的装载设计与严格的周期管理。只有通过全流程验证，才能确保灭菌过程符合ISO 17665等法规要求，为实验室生物安全与医疗质量提供保障。