离子色谱预处理柱是保障分析结果准确性的关键部件,其性能直接影响检测灵敏度和数据可靠性。在使用过程中,需注意以下事项:
一、安装与连接
正确安装:预处理柱应安装在色谱柱盒中,确保密封圈放置正确,防止漏液。入口和出口需连接紧密,避免压力损失。
轻拿轻放:安装与拆卸时避免剧烈碰撞或扭曲,防止柱体损坏或密封性下降。
二、流动相选择与处理
流动相要求:建议使用经过滤的超纯水(电阻率>18MΩ)作为流动相,避免颗粒物堵塞柱体。若需使用有机溶剂,需确保其质量并定期更换。
pH值调整:根据分析需求调整流动相pH值,避免极端pH条件对柱体填料造成损害。
气泡去除:流动相需经超声、抽滤等方法去除气泡,防止峰形异常或柱压波动。
三、样品前处理
杂质去除:根据样品性质选择沉淀、过滤、离心等方法去除悬浮颗粒,防止堵塞柱体。
代表性保障:确保样品处理过程不改变其成分,以获得准确的分析结果。
稀释与过滤:高浓度样品需稀释后过滤,避免污染物累积影响下次分析。
四、操作过程控制
柱压监测:实时关注柱压变化,若突然升高可能是流动相堵塞或色谱柱损坏,需立即停止进样并检查。
温度控制:保持恒温操作,避免温度波动影响流动相粘度及分离效果。
进样量控制:保证进样量适中,避免过载或不足;进样针需清洁,防止残留物干扰分析。
流速控制:根据柱体规格调整流速(如2mL/min),确保样品充分净化且不损伤填料。
弃去初始液:进样时弃去前几毫升过柱样品(如1mL规格柱弃去3mL),避免活化液或杂质影响结果。
五、安全与防护
有机溶剂安全:使用有机溶剂时远离火源,存放于阴凉通风处,防止易燃易爆风险。
个人防护:操作时佩戴护目镜、实验室手套等防护用品,避免接触腐蚀性或有毒物质。
六、维护与保养
日常清洗:使用后用纯水或指定溶剂反向冲洗柱体,清除颗粒物或化学残留。高浓度样品检测后需立即清洗。
顽固污染处理:对顽固性污染可延长冲洗时间或采用梯度洗脱,但需避免使用强腐蚀性试剂。
闲置保存:
短期闲置:用纯水冲洗后浸泡在保护液中,防止填料干燥或滋生微生物。
长期存放:干燥柱体后密封保存于阴凉避光处,避免高温或潮湿加速材料老化。
重新启用:长期闲置后需用流动相充分冲洗,恢复柱体性能。
七、再生与重复使用
再生方法:
反相柱(如C18、RP):用20mL甲醇清洗有机物,再用10mL水冲洗,避免交叉污染。
离子型柱(如H、Na、Ag、Ba):用10mL水洗净柱体,根据填料颜色变化判断是否可重复使用(如Ag柱吸附Cl?后变黑,3/4变色时需更换)。
使用次数限制:建议反相柱重复使用不超过3次,离子型柱根据填料容量和样品杂质含量推算使用次数。
八、性能测试与更换
定期测试:通过对比标准样品的保留时间、峰形和分离度,判断柱效是否下降。
及时更换:若发现分离效率降低或基线波动异常,需排查原因并更换新柱。
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