实验室里的宝藏：AF594 Ethyl NHS Ester大揭秘！

高荧光亮度：AF594 是一种水溶性的红荧光染料，荧光亮度高，光稳定性好。

pH稳定性：在pH 4-10范围内荧光不受影响。

高标记效率：通过NHS酯基团与生物分子中的伯胺（-NH2）反应，形成稳定的酰胺键。

高水溶性：磺化结构使其具有良好的水溶性，减少蛋白质聚集。 

基础知识概述:  

英文名：AF594 Ethyl NHS Ester 

规格标准：1mg、5mg、10mg 

试剂厂家：陕西新研博美生物科技有限公司

相关应用：

1.蛋白质标记：

可用于标记抗体、蛋白质、肽段等生物分子。

2.核酸标记：

可用于标记胺修饰的寡核苷酸。

3.多色成像：

适用于多色荧光显微镜、流式细胞术和超分辨成像技术（如dSTORM、SIM、STED等）。

使用方法：

1.标记蛋白质：

准备蛋白质储备液（溶液A）：

将100 μL反应缓冲液（如pH 8.5-9.0的1 M碳酸氢钠溶液）与900 μL目标蛋白溶液（浓度>2 mg/mL）混合。

蛋白质溶液的pH值应为8.5±0.5。

准备染料储备液（溶液B）：

将无水DMSO加入AF594 NHS酯中，制备10 mM储备溶液。

染料储备溶液应在制备后立即使用，避免长期保存。

进行偶联反应：

使用10:1的摩尔比（染料/蛋白质）作为起始点，将5 μL染料储备液加入到95 μL蛋白质溶液中。

在室温下孵育30-60分钟。

纯化偶联物：

使用Sephadex G-25柱纯化染料-蛋白质偶联物。

2.标记寡核苷酸：

按照类似步骤进行标记，调整反应条件以适应寡核苷酸。

包装：

质量控制：95%+