三聚氰胺检测卡的工作原理：免疫层析技术与抗原抗体反应

来源：山东蓝都生物科技有限公司 2025年07月09日 10:03

　　三聚氰胺检测卡基于竞争抑制免疫层析技术，通过抗原抗体特异性结合实现快速筛查。其核心原理可分为以下步骤：

　　1.胶体金标记抗体：信号载体与识别元件

　　检测卡中预先将抗三聚氰胺单克隆抗体与胶体金颗粒（直径20-40nm）结合，形成金标抗体复合物。胶体金颗粒通过静电作用稳定分散，其表面标记的抗体可特异性识别三聚氰胺分子。例如，深圳后王电子科技有限公司的检测卡采用高亲和力单克隆抗体，确保对三聚氰胺的检测灵敏度达0.5mg/kg（液态奶）。

　　2.硝酸纤维素膜固定抗原：检测线与质控线

　　在硝酸纤维素膜上，通过喷涂技术固定两条关键线：

　　检测线（T线）：包被三聚氰胺-载体蛋白偶联物（如三聚氰胺与牛血清白蛋白结合），作为竞争结合位点。

　　质控线（C线）：包被抗鼠IgG抗体，用于验证检测流程有效性。

　　3.竞争反应：样本中的三聚氰胺与固定抗原“争夺”抗体

　　当样本（如液态奶、奶粉稀释液）滴入加样孔后，通过毛细作用沿膜层析：

　　阴性样本：不含三聚氰胺时，金标抗体未被结合，继续迁移至T线，与固定偶联物结合形成红色条带；同时，部分金标抗体与C线抗鼠IgG结合，显示第二条红色条带。此时T线和C线均显色，判定为阴性。

　　阳性样本：含三聚氰胺时，样本中的三聚氰胺与金标抗体结合，封闭其抗原结合位点，阻止其与T线偶联物结合，导致T线不显色；而C线仍显色，验证检测有效。此时仅C线显色，判定为阳性。

　　4.结果判定与灵敏度控制

　　灵敏度：通过调整金标抗体浓度、T线偶联物密度及层析速度，实现检测限优化。例如，智云达检测卡对液态奶的检测限为0.5mg/kg，婴儿奶粉为1mg/kg。

　　无效判定：若C线未显色，无论T线如何，均视为检测卡失效，需重新检测。

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