为确保空气微生物采样器样本处理的准确性,需从采样前准备、采样过程控制、样本保存运输、实验室检测到质量监控全流程实施标准化操作。以下是分阶段的关键措施及技术要点:
一、采样前的设备校准与环境控制
1.采样器性能校准
流量校准:使用皂膜流量计(如TSI4140)校准采样泵流量,误差需≤±5%(ISO14698-1标准要求)。例如,100L/min的采样器需在30-150L/min范围内分段校准,每10L/min记录一次偏差。
体积计量验证:通过称重法校准采样体积(如水收集法),1m³采样量的误差应<±10L。
冲击效率测试:使用标准粒子(如1-5μm聚苯乙烯微球)测试采样器对微生物的捕获效率,需达到≥90%(参考NIEHS空气采样器验证方案)。
2.采样环境预处理
采样点消毒:用75%乙醇擦拭采样器外壳及采样口,作用10分钟后风干,避免表面微生物污染样本。
背景污染控制:采样前30分钟停止人员走动,开启空气净化设备(如HEPA过滤),使背景菌落数<50CFU/m³(GB/T18204.1-2013标准)。
二、采样过程中的标准化操作
1.无菌操作规范
人员防护:穿戴无菌实验服、手套(如医用丁腈手套),采样时距离采样口≥30cm,避免呼吸或体表脱落微生物污染。
采样头更换:每批次采样前更换无菌采样头(如撞击式采样器的培养皿需提前灭菌,121℃高压蒸汽灭菌20分钟)。
2.采样参数控制
采样时间:根据预期浓度调整采样时长,确保平板菌落数在30-300CFU之间(CLSIM22-A3标准)。例如,高污染环境(如医院病房)采样10分钟,洁净室采样30分钟。
采样高度:环境监测时采样口距地面1.2-1.5m(模拟呼吸带),工业场景需根据气流方向调整(如距污染源上风侧1m处)。
三、样本保存与运输的稳定性保障
1.温度与时间控制
短期保存:采样后立即将样本置于4℃冷藏(如便携式恒温箱),保存时间≤4小时(GB4789.2-2022要求),避免微生物过度繁殖或死亡。
长途运输:使用干冰(-78℃)或冰袋(0-4℃)维持低温,同时用防震材料包裹,防止培养皿晃动导致菌落重叠。
2.防污染包装
双层密封:样本先装入无菌自封袋,再放入防漏金属罐(如铝制容器),外层贴生物危害标识。
湿度控制:在包装内放置硅胶干燥剂,使相对湿度<30%,避免培养基受潮霉变。
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