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尺寸排阻色谱柱是一种广泛应用于生物分析领域的工具，其工作原理主要基于分子大小差异进行分离。利用柱内固定相中孔隙与分子间的物理作用来实现分离。具体来说，聚合物分子在柱子中的孔道中被筛选，较大的分子无法通过尺寸较小的孔道，只有较小的分子才能通过这些孔道，从而实现不同分子尺寸的分离。其优点在于其分离速度快、操作简单、分离效果好。此外，该技术不依赖于分子之间的亲和性或化学性质，因此适用于各种生物大分子，如蛋白质、多肽和核酸等的分离。
尺寸排阻色谱柱的清洗步骤
1、判断清洗时机：随着使用时间或进样次数的增加，出现柱效下降无法达到分离要求，或伴有峰型拖尾、分叉等情况时，就需要清洗色谱柱。
2、反向连接与冲洗：建议清洗过程中将色谱柱与检测器断开连接，防止流通池污染。反向连接色谱柱，并以最大流速的1/2运行色谱柱。
3、具体清洗流程：使用5倍柱体积（CV）的pH3.0、0.5mol/L Na?SO?水溶液冲洗色谱柱；使用5CV的Milli-Q或去离子水冲洗；使用5CV的20%乙腈清洗；再使用5CV的Milli-Q或去离子水冲洗。
4、正向连接与平衡：清洗完成后，再正向连接色谱柱，并以样品分析时的流速使用至少10CV的流动相来平衡色谱柱，应逐渐提高流速，以免损坏色谱柱。
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