产品推荐:气相|液相|光谱|质谱|电化学|元素分析|水分测定仪|样品前处理|试验机|培养箱


Ky开元集团>技术中心>其他文章>正文

欢迎联系我

有什么可以帮您? 在线咨询

为了长期保存Jurkat细胞可以采用冻存方法

来源:武汉尚恩生物技术有限公司   2025年06月18日 09:11  
  Jurkat细胞主要用于研究急性T细胞白血病的发病机制、病理过程等。由于它源自急性T细胞白血病患者,其细胞特性与疾病的发生发展密切相关,为研究人员提供了良好的体外模型,有助于深入了解白血病细胞的增殖、分化异常以及相关基因表达变化等情况。由于该细胞具有T细胞的相关特性,能够支持HIV的感染和复制,科研人员可以利用它来筛选抗HIV药物,研究HIV与宿主细胞之间的相互作用,探索HIV感染后免疫系统的变化规律等。
 
  Jurkat细胞的培养与操作注意事项:
 
  -培养条件:需要在特定的培养基中进行培养,一般为RPMI -1640培养基,并添加10的胎牛血清(FBS),以保证细胞的生长和增殖所需的营养物质和生长因子。同时,要维持适宜的温度(通常为37℃)、二氧化碳浓度(一般为5)和湿度等环境条件。
 
  -传代操作:传代时需要注意适当的比例,一般按照1:3的比例进行传代,避免细胞密度过高或过低影响细胞的生长状态。在操作过程中,要严格遵循无菌操作原则,防止细菌、真菌等污染,因为一旦细胞被污染,可能会影响实验结果的准确性,甚至导致细胞系的特性发生改变。
 
  -冻存与复苏:为了长期保存,可以采用冻存的方法。冻存时需要使用合适的冻存液,一般包含DMSO等成分,以保护细胞在低温下的存活。复苏时要注意快速融化,并及时更换新鲜的培养基,让细胞适应新的生长环境。
 
  Jurkat细胞的测定步骤:
 
  1.细胞培养与准备
 
  -细胞复苏:从液氮或-80℃冰箱中取出冻存管,迅速放入37℃水浴锅中,轻轻摇动使其快速融化。在超净工作台中,将融化的细胞悬液转移到含有预热培养基的离心管中,离心去除冻存液,然后接种到培养瓶中,加入适量培养基,置于培养箱中。
 
  -细胞计数:当细胞生长至一定密度时,取适量细胞悬液,用血细胞计数板或自动化细胞计数仪进行细胞计数,以确定细胞浓度。
 
  2.具体实验测定
 
  -流式细胞术胞内染色:计数,每个样品取2×10?的细胞于无血清的RPMI培养基,37℃ Rest处理1h。每组实验分为0min/2min/5min的样,分别用100μl的PBS重悬,转移到96孔板。刺激物和细胞置于37℃水浴锅或者金属浴5min预热。加入50μl的3×刺激物,37℃孵育固定时间点后快速加入200μl 4 PFA终止刺激并固定细胞,轻微吹吸避免细胞聚团,37℃处理15min。
 
  -细胞增殖检测:例如利用CCK-8实验检测增殖水平时,将不同浓度的药物或刺激物与Jurkat细胞共同培养24h或48h,然后加入CCK-8试剂,继续培养一段时间,用酶标仪测定吸光度,以评估细胞增殖情况。

免责声明

  • 凡本网注明“来源:Ky开元集团”的所有作品,均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-Ky开元集团合法拥有版权或有权使用的作品,未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的,应在授权范围内使用,并注明“来源:Ky开元集团”。违反上述声明者,本网将追究其相关法律责任。
  • 本网转载并注明自其他来源(非Ky开元集团)的作品,目的在于传递更多信息,并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责,不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时,必须保留本网注明的作品第一来源,并自负版权等法律责任。
  • 如涉及作品内容、版权等问题,请在作品发表之日起一周内与本网联系,否则视为放弃相关权利。
企业未开通此功能
详询客服 : 0571-87858618