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一、办法学的影响
ELISA测定形式包含以下几种：双抗体夹心法、间接法、双抗原夹心法、IgM抗体捕捉法、竞争抑制法，其间竞争抑制法(HBeAb,HBcAb等选用)因受操作时差所引起的竞争等要素的影响，成果重复性较差，质量较难操控。
二、试剂要素
不同批次的ELISA试剂在制作进程中很难保证质量一致，即使是通过批批检的项目其检测成果也存在差异，因而必须挑选和订购长批号的试剂，并保证保存条件。严格执行这一规范可以防止因试剂批号改动而从头建立质控体系及从头评估试剂的杂乱进程，并且能够保证成果的稳定性；关于效期短、使用率低的试剂，应当小量分装，每次使用则取分装部分即可，防止重复冻融造成试剂的失效。
三、样本要素
标本搅扰要素包含内源性搅扰要素和外源性搅扰要素，前者包含类风湿因子、补体、异嗜性抗体、本身抗体、溶菌酶等，后者包含标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存时刻过长、标本凝结不全、冷冻标本的重复冻融等。
四、操作要素
ELISA操作步骤杂乱，操作不当将引起较大的差错。加样、温育、洗刷、显色、比色。
五、灰区的设置
通常情况下，ELISA定性试验以“阳性”和“阴性”来报告成果，两者间有一条分界线被称为“阳性判别值”(cut-off value，CO值)，这是定性免疫测定成果报告的根据。
六、标本复查
ELISA手工检测进程杂乱，影响要素较多，即使室内质控在控，也或许因孔间差异而造成成果的差异，因而加大复查力度是保证成果准确性的牢靠办法，比如对HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等项目的可疑、弱阳性标本及罕见形式的检测成果进行复查。
七、常表明成果的常用办法
a.定性测定
b.半定量测定 成果一般以滴度表明。
c.定量测定 即用已知量的规范品作一系列稀释后进行ELISA测定，制作规范曲线，成果以肯定量或单位表明。在ELISA定量检测中每一块反应板都必须制作相应的规范曲线。
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