一抗和二坑的区别:
第一抗体就是平常所说的抗体,即能和抗原特异性结合。
第二抗体是能和抗体结合的,即抗体的抗体。主要用于检测抗体的存在。
一抗是针对抗原的抗体,二抗是针对一抗的抗体。即抗体也可以充当抗原刺激机体产生抗体。也就是说,抗原进入机体刺激机体免疫系统产生免疫应答,由B细胞可以产生与相应抗原发生特异性结合的特殊蛋白质。
抗体溶解方法:
方法一:我们的抗体(冻干粉)已经包含了0.01M PBS、1%BSA和0.1%防腐剂,您只需要加入灭菌的双蒸水就行了。抗体溶解后,置于-20℃保存,分装后使用,避免反复冻融,可保证至少1年有效;
方法二:也可以只加入一半体积的双蒸水,再用一半体积的甘油补足,置于-20℃保存,这样抗体不会冻,有利于抗体的稳定。
后续试验时,再使用对应的缓冲液稀释成工作液,即用即配。
我们的抗体(冻干粉),在常温放置下,至少一个月有效;若在-20℃下保存(推荐),至少三年有效。
抗体修复方式:
修复液:0.01M枸橼酸(pH6.0)或者0.05M EDTA(pH8.0)
抗体修复方法:
方法1:沸水浴修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境,保持外部沸腾状态15min,自然冷却至室温。
方法2:微波修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷却至室温。
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