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供货周期 | 现货 | 应用领域 | 化工,生物产业 |
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AMEKO试剂:特超敏ECL化学发光底物
AMEKO试剂:特超敏ECL化学发光底物
产品用途:
用于HRP标记抗体的Western Blot和HRP标记探针的核酸杂交。
产品特点:
1、灵敏度高:可检测低皮克级的蛋白;
2、信号持续时间长:光信号持续时间长达5小时;
3、稳定试剂:工作液在24小时内保持稳定;
4、成像方法:适用于X/射线/胶片、CCD或激光凝胶成像仪;
5、价格经济:针对稀释的抗体浓度条件进行了优化,节省抗体:
一抗:以1 µg/mL储存液稀释1:1,000至1:4,000倍
二抗:以1 µg/mL储存液稀释1:2,000至1:5,000倍
6、简单易用:可替代其它公司的ECL发光底物,操作步骤无需进行特别优化;
使用方法:
1、执行常规 SDS-PAGE、转膜和Western Blot步骤。注意用HRP标记IgG或用一抗-链亲和素-生物/素-HRP夹法。
2、Western Blot最后一次洗膜的同时配制发光工作液:分别取等体积的A液和B液,放入干净容器中混合(注意吸取A液和B液的吸头一定要分开,避免试剂污染)。建议立即使用工作液,室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。
3、Western Blot最后一次洗膜后,用镊子将膜取出,用滤纸吸去多余的洗涤液(切勿接触膜的蛋白面),然后置于一洁净保鲜膜上或塑料容器内。
4、根据膜的大小,按比例滴加配置好的ECL工作液到膜上,确保工作液均匀覆盖在膜上,放置1-3分钟。
5、取膜,用滤纸吸去多余的液体,将膜放在两片保鲜膜中间,随后进行压片检测或化学发光成像仪检测。
6、压片检测:将膜固定于X光胶片暗盒内(注意蛋白面向上)。暗房内压X光胶片,分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。
7、化学发光成像仪检测:将膜放置到化学发光成像仪内,参考仪器说明书进行检测。
注:建议第一次曝光60秒,之后可调整曝光时间以达到优良结果。化学发光反应在底物孵育后的前5-30min期间是烈的。这一反应可以持续几个小时,但强度会随时间下降,如有底物孵育后较长时间后曝光,曝光时间可能需要延长以获得较强信号。
保存条件:室温运输,4°℃密封避光保存一年,短期可放置室温。
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