| 供货周期 | 一周 | 规格 | 10mL |
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| 货号 | abs50193 | 主要用途 | 细胞活性检测 |
| 描述 | 细胞活力检测有多种方法，如检测染料排除的，检测 ATP 产生的，检测酶对底物降价活性的等。荧光素酶检测法应用比较广泛，是基于活细胞产生 ATP 的能力的。由于是细胞检测，有时需要有内参对照，由此产生 multiplex 分析需求，即对同一多种分析方法同时检测，相互不干扰，彼此检测机理不同，如此可以进行相关对比，从而排除实验因素外的数据差异。国外 CellTiter Fluor （CTF）类产品就是基于这样的原理设计的。本公司自行研发推出了同类的荧光细胞活力检测试剂盒（Fluorescent Cell Viability Assay Kit），性能上与国外品牌产品无明显差异。本产品是基于细胞蛋白酶对多肽产物的降解，产生荧光信号。细胞膜完整性受损时，该蛋白酶就失去了对底物的降解活性。CTF-LTM与荧光素酶试剂盒检测原理不同，检测方法也不同，其检测灵敏度次于荧光素酶法，但是可以检测到更早期的轻微的细胞损害，两个检测相容性好，可以进行multiplex 检测。 产品特性： 1、性能 检测信号，Window，灵敏度与特异性与国外品牌同类产品类似。 2、相容性 与CTG等常用分析试剂相容，不形成相互影响。 3、特征 对细胞早期膜损伤更敏感。 4、便捷 “加入-混合—温育-检测”，整个实验步骤简单，易操作。 产品组成： 蛋白酶底物，缓冲液混合后灌装于 10 mL 或 100 mL 的棕色瓶中及 2ml 管中，规格如下：
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| 使用方法 | 1、细胞准备： （1）在 96 孔或 384 孔细胞培养板铺合适密度的待检测细胞。建议使用白板。 （2）准备待检化合物。将合适浓度的待检测化合物加到细胞板孔中。培养液中有机溶剂浓度保持在1～2%以下。设立未加化合物的对照组。根据项目需求继续培养合适的时间。 2、细胞活力检测： （1）取出 CTF-LTM细胞活力检测试剂，在室温平衡 20 分钟。轻摇混匀。 （2）配制 CTF 反应液：CTF 底物是 100x 的，用 CTF 缓冲液配成 1x 反应液，充分混匀，与待检测细胞等体积混合使用。 （4）向培养板孔内加入等体积的 CTF 反应液，轻摇 20 秒钟混匀，避光 37 ℃ 反应60～90 分钟。 （5）在读板仪上读取荧光信号，激发波长 380nm，发射波长 510nm。 （6）根据需要，继续进行下游的 multiplex 分析。 | |||||||||||||||
| 注意事项 | 1、试剂量：非经严格验证，不建议随意改变反应试剂用量。如使用 96 孔反应板，一般建议50uL培养液加等体积 CTF 反应液，后续检测再加与 CTF 反应液等体积的 multiplex 检测反应液（如CTG 反应液）。其它反应板作对应体积调节。建议将底物分装，每次从底物stock 新鲜配制反应液。 2、必要时调整培养板反应孔内的实际剩余培养液体积，以保证 multiplex 分析总体积不超过200uL（96 孔板）或 40 uL（384 孔培养板）。 3、读板时间：在加入试剂并于 37 ℃温育 30 分钟后，可以进行读板，但是其检测灵敏度低于37 ℃温育 60 分钟或 90 分钟的结果。 | |||||||||||||||
| 基本信息 | ||||||||||||||||
| 储存/保存方法 | -20℃及以下避光储存，有效期12个月。 |
温馨提示：本产品仅作科研实验使用，不支持临床等研究
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Ky开元集团