提取仪校准检测 仪器设备计量校验合作机构

核酸提取仪的校准需依据JJF 1874-2020《(自动)核酸提取仪校准规范》进行，主要涵盖以下关键内容：

一、校准适用范围

?设备类型?：适用于全自动/半自动核酸提取仪，包括磁珠法和离心柱法原理的设备，通量范围1-96样本/批次。

?核心系统?：需校准温控系统、振荡系统、取液系统及分离纯化系统等模块。

二、计量特性要求

需校准以下关键参数：

?温度相关?：示值误差、均匀性、稳定性（如37℃/95℃双温度点测试）；

?振动频率?：示值误差及稳定性（范围0.1-500Hz）25；

?取液系统?：取液量示值误差、重复性及一致性（使用电子天平，分度值0.1mg）；

?提取效率?：核酸回收率（需≥90%）、重复性及交叉污染率（棋盘法验证假阳性率）。

三、校准条件与设备

?环境要求?：温度10-30℃、湿度≤80%，无机械振动和电磁干扰。

?标准设备?：

温度测量装置（MPE±0.3℃）；

振动频率测量仪（0.1级）；

电子天平（分度值0.1mg）；

核酸标准物质（浓度≥1000ng/μL，Urel≤5%）。

四、典型校准流程示例

?提取效率校准?：

使用梯度浓度DNA标准品（10-10? copies/μL），提取后通过qPCR检测回收浓度，计算效率η=(C提取后/C初始)×百分之一百。

?交叉污染验证?：

96孔板交替排布阳性/阴性样本，检测阴性样本假阳性率。

?温控模块测试?：

探头布点于加热模块几何中心及边缘，采样间隔≤10s，判定ΔT=Tmax-Tmin。

五、常见问题与整改

?提取效率低?：可能因磁棒磁力衰减（需≥800mT）或移液量偏差（如设定100μL实际80μL），需更换磁棒或校准移液泵。

?交叉污染超标?：多由吸头更换机构卡滞或废液槽气溶胶回流引起，需清洁机械导轨并增加紫外消杀。