PH PH细胞|STR入库

PH细胞|STR入库

产品名称：PH细胞

是否STR：是

供应公司：慧颖生物

复苏周期：1-2周

您是否在关心各种细胞系特异性鉴定方法，是否被细菌，病毒，支原体污染，购买慧颖生物细胞株细胞系值得放心，大部分细胞经过STR鉴定，支原体，细菌，病毒检测后入库。！

分离培养法

分离培养法是支原体检测的金标方法，其检测精确度zui高。这种方法是从可疑的细胞培养体系中取样，并接种到zui适宜支原体生长的琼脂平板上。如果样本中含有支原体，它们就会在这种琼脂平板上*生长，zui终形成明显可见的特征性菌落。分离培养法基本不会出现假阴性结果，因此被誉为支原体检测金标准。不过分离培养法也存在两个弊端，一是检测时间太长，支原体要长出明显克隆至少需要4周时间。二是尽管可以检测绝大多数支原体种类，分离培养法也有力所不及的时候，例如支原体M. hyorhinis。

DNA检测

DNA检测需要将可疑样品与指示细胞共同培养，因此一般需要几天时间。DNA检测所用的指示细胞通常是细胞质区域较大的Vero细胞，如果原样本中含有支原体，那么当细胞DNA被荧光染料（如Hoechst染料）染色时，就可以在指示细胞的核周围观察到荧光斑点或荧光颗粒。分离培养法用来检测支原体M. hyorhinis菌株并不可靠，而DNA法可以准确的将其检测出来。

PCR法

PCR法也可以检测M. hyorhinis菌株，PCR法检测支原体只需几个小时，是zui快但也是zui不灵敏的支原体检测方法。该方法采用针对支原体DNA的引物用PCR检测可疑样本，其中PCR引物通常针对支原体的16S rRNA基因。在凝胶电泳过程中，支原体DNA会显示为特异性条带，以此指示支原体的存在。PCR法可以检测大多数支原体，但谨慎起见同时使用另一种检测方法来进行验证。

酶学检测和ELISA

此外，也还存在一些其他支原体检测方法。例如酶学检测是将可疑样本添加到特定底物中，在这一体系内支原体的酶可以将ADP转化为ATP，随后能利用ATP发光的luciferase酶就可以指示支原体的存在。ELISA也能用于支原体检测，以ELISA法为基础的支原体检测一般使用针对支原体16S rRNA基因的带标记探针或抗体，来检测培养物中是否含有支原体。

定期检测

支原体感染会使培养细胞慢慢枯萎，因此对培养细胞定期进行支原体检测非常重要。一般来说每1至3个月就应该进行一次支原体检测。将定期支原体检测常规化坚持下去，是细胞培养实验室应对支原体感染的关键。

PH细胞|STR入库

出库公司 细胞代号 细胞名称 备注

慧颖生物 siha 人宫颈癌细胞 STR

慧颖生物 MCF-7 人乳腺癌细胞 STR

慧颖生物 Hela 人宫颈癌细胞 STR

慧颖生物 HCT116 人的结肠癌细胞 STR

慧颖生物 Hep G2 人肝癌细胞 STR

慧颖生物 NCI-H1437 人肺癌细胞 STR

慧颖生物 DU 145 人前列腺癌细胞 STR

慧颖生物 HT1080 人纤维肉瘤细胞 STR

慧颖生物 T24 人膀胱移行细胞癌细胞 STR

慧颖生物 T47D 人乳腺管癌细胞 STR

慧颖生物 5637 人膀胱癌细胞 STR

慧颖生物 U251 人胶质瘤细胞 STR

慧颖生物 PANC-1 人胰腺癌细胞 STR

预防支原体污染的建议：

  培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：

控制环境污染;

严格实验操作;

细胞培养基和器材要保证无菌;

在细胞培养基中加入适量的抗生素。

支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体zui突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如 -内酰胺类、万古霉素等*不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体zui有抑制活性及常用于支原体感染治疗的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些氟喹诺酮;其他类抗生素如氨基糖苷类、氯霉素对支原体有较小抑制作用，所以常不用来作为支原体感染的化学治疗剂。

支原体污染在细胞培养中实际上是比较常见的, 据资料, 可达30%甚至更高. 支原体污染时细胞表现为长得不好,也不死亡, 同时, 培养基又是清亮的. 时间长达一周也没有什么变化. 这时基本上可以判断出是支原体污染了, 愿意检测就检测一下,不愿意直接用清除试剂处理吧.

避免细胞污染，可以从预防着手，超净工作台物品放置要合理、进入细胞房要换鞋和穿实验服、实验员戴手套后要用酒精等消毒、避免细胞交叉污染等等。