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BY-0871 C8-D1A小鼠小脑组织细胞系

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C8-D1A小鼠小脑组织细胞系

C8-D1A小鼠小脑组织细胞系是研究小脑 发育与神经退行性疾病的重要模型,源自小鼠小脑 组织的原代培养细胞,经克隆筛选获得,保留了小脑 细胞的核心生物学特性,在神经科学基础研究及药物研发中应用广泛。

来源与背景:该细胞系源自新生 BALB/c 小鼠的小脑 组织,通过酶解分离浦肯野细胞及神经胶质细胞,经体外传代与克隆纯化建立。与原代小脑 细胞相比,其克服了体外存活时间短的局限,可稳定传代且保留神经胶质细胞的功能特征,尤其适合模拟小脑 组织的细胞间相互作用,为研究小脑 发育机制和相关疾病病理过程提供了理想的体外模型。
细胞特性:形态上呈现典型的神经胶质样特征,胞体呈星状或梭形,突起丰富且细长,细胞间通过突起形成网络状连接,贴壁生长紧密,排列具有一定层次感。核心特性包括神经胶质细胞标志物表达,高表达胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和 S100β,这两种蛋白是星形胶质细胞的特异性标志物,同时低表达神经元标志物 NeuN,表明其主要为胶质细胞群体;突触相关功能,可分泌神经营养因子如 BDNF 和 GDNF,对神经元的存活与功能维持具有支持作用,细胞培养液中 BDNF 浓度可达 15-20pg/mL。细胞倍增时间约 48-60 小时,生长速度较肿瘤细胞缓慢,但传代稳定性强,连续传代 50 次后仍能保持形态与功能的一致性,传代时需用温和的消化液处理,传代比例 1:3-1:4,以避免损伤细胞突起。
培养条件:采用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培养基,添加 1% 防污染试剂预防微生物污染,另需补充 20ng/mL 表皮生长因子(EGF)和 10ng/mL 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)以维持神经胶质细胞的增殖与特性。培养环境需严格控制在 37℃、5% CO?饱和湿度,且需避免强光直射,每 3-4 天更换一次培养基,确保细胞处于适宜的营养环境中。与肿瘤细胞不同,其对培养器皿的表面处理较为敏感,使用多聚赖氨酸包被的培养瓶可显著提高细胞贴壁率和突起生长能力。
检测鉴定:经微生物检测,该细胞系无支原体、细菌、真菌及病毒污染,符合实验细胞的洁净标准。免疫荧光染色显示,90% 以上的细胞呈 GFAP 和 S100β 阳性,NeuN 阳性细胞比例低于 5%,明确其以神经胶质细胞为主的细胞组成。染色体核型分析显示,其保留 BALB/c 小鼠的正常核型特征,无明显染色体异常,确保了细胞系的遗传稳定性。功能验证实验中,该细胞系在谷an酸刺激下可发生钙信号波动,体现了神经胶质细胞的典型应答特性,进一步证实其功能完整性。
应用领域:在神经发育研究中,C8-D1A 细胞系常用于探索小脑 胶质细胞的分化调控机制,通过调控 EGF 和 bFGF 的浓度,可观察细胞向成熟星形胶质细胞的分化过程,为揭示小脑 组织发育的细胞信号通路提供依据。在神经退行性疾病研究中,可用于模拟小脑 相关疾病如脊髓小脑共济失调的病理状态,通过过表达突变型 ATXN3 基因,构建疾病模型,研究蛋白聚集对胶质细胞功能的影响及神经元损伤机制。在药物研发方面,适用于神经毒性评估,检测候选药物对细胞存活率、突起生长及神经营养因子分泌的影响,筛选对小脑 组织无毒性的药物。此外,该细胞系还可与小脑 神经元共培养,构建神经元 - 胶质细胞相互作用模型,用于研究神经炎症反应中胶质细胞的激活机制。
该细胞系的优势在于能稳定模拟小脑 组织中神经胶质细胞的生物学特性,填bu了原代小脑 细胞体外培养周期短的不足,为长期研究胶质细胞功能及与神经元的相互作用提供了可靠工具。其与 BALB/c 小鼠的遗传一致性,也使其在构建体内外联动模型时具有良好的兼容性,可减少实验中的种属差异影响。
总之,C8-D1A 小鼠小脑组织细胞系凭借其du特的生物学特性和稳定的功能表现,成为小脑 研究领域的重要工具,为神经科学基础研究和相关疾病的治疗策略开发提供了坚实的实验基础。

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