Ky开元集团手机版
移动端访问更便捷
药品质量检测方法：薄层色谱法
2022年08月24日 11:53:39
来源：Ky开元集团 作者：小王 点击量：8707
薄层色谱法是一种以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的层析分离技术，能够快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质，因此自50年代发展起来之后，一直被应用在生物研究、药物研究、环境化学等多个领域。
【化工仪器网 行业百态】薄层色谱法是一种以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的层析分离技术，能够快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质，因此自50年代发展起来之后，一直被应用在生物研究、药物研究、环境化学等多个领域。
从技术本身优势来说，薄层色谱法对被分离物质的性质没有限制，因此使用范围较广。并且平面薄层具有多路柱效应，因此理论上可以进行多个样品的分离。与此同时，得力于现代技术以及相关仪器的进步，在仪器化、自动化的今天，薄层色谱的分辨率及重现性也得到了了显著提升。
准备工作
薄层色谱法需要要准备薄层板(按支持物的材质分为玻璃板、塑料板或铝板等；按固定相种类分为硅胶薄层板、键合硅胶板、微晶纤维素薄层板、聚酰胺薄层板、氧化铝薄层板等；按固定相粒径大小分为10~40µm普通薄层板和5~10µm高效薄层板)、点样器(一般釆用微升毛细管或手动、半自动、全自动点样器材)、展开容器(上行展开一般用适合薄层板大小的专用平底或双槽展开缸，展开时须能密闭；水平展开用专用的水平展开槽)、显色装置、检视装置。
薄层板制备
需要注意的是，市售薄层板与自制薄层板的准备工作并不相同。市售薄层板临用前一般应在 110℃ 活化 30 分钟(聚酰胺薄膜不需活化)。如在存放期间被空气中杂质污染，使用前可以用三氯甲烷、甲醇或二者的混合溶剂在展开缸中上行展开预洗、晾干后，再进行活化，并置干燥器中备用。其中，铝基片薄层板、塑料薄层板可根据需要剪裁，但须注意剪裁后的薄层板底边的固定相层不得有破损。
而自制薄层板操作就较为复杂了。除另有规定外，首先将 1 份固定相和 3 份水(或加有黏合剂的水溶液，如 0.2%~0.5%羟甲基纤维素钠水溶液，或为规定浓度的改性剂溶液)在研钵中按同一方向研磨混合，去除表面的气泡后，倒入涂布器中。然后，在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布(厚度为 0.2~0.3mm)，完成后取下涂好薄层的玻板，置水平台上于室温下晾干后，在 110℃ 烘 30 分钟，随即置于有干燥剂的干燥箱中备用。需要注意的是，自制薄层板使用前需检查其均匀度，方法是在反射光及透视光下检视，确保表面应均匀、平整、光滑，并且无麻点、无气泡、无破损及污染。
点样与展开
点样无特殊规定需在洁净干燥的环境中进行，用点样器点样于薄层板上。一般为圆点状或窄细的条带状，点样基线距底边 10~15mm，高效板一般基线离底边 8~10mm。圆点状直径一般不大于 4mm，高效板一般不大于 2mm。接触点样时注意勿损伤薄层表面。条带状宽度一般为 5~10mm，高效板条带宽度一般为 4~8mm，可用专用半自动或自动点样器械喷雾法点样。点间距离可视斑点扩散情况以相邻斑点互不干扰为宜，一般不少于 8mm，高效板供试品间隔不少于 5mm。
之后将点好供试品的薄层板放入展开缸中，浸入展开剂的深度为距原点 5mm 为宜，密闭保存，待溶剂前沿达到规定的展距，取出薄层板并晾干。需要注意的是，展开前如需要溶剂蒸气预平衡，可在展开缸中加入适量的展开剂后密闭，一般保持 15~30 分钟即可。当溶剂蒸气预平衡后，应迅速放入载有供试品的薄层板并立即密闭。如需使展开缸达到溶剂蒸气饱和的状态，则须在展开缸的内壁贴与展开缸高、宽同样大小的滤纸，一端浸入展开剂中，密闭一定时间，使溶剂蒸气达到饱和再如法展开。
显色与检视
一般情况下，有颜色的物质可以再在可见光环境下直接检视，无色物质则需先进行显色。显色依据物质不同采取的方法也不同，一般采用喷雾法或浸渍法佐以显色剂或者直接通过加热显色来实现。另外，如果物质带有荧光或显色后可激发产生荧光，可以借助紫外光灯(365nm 或 254nm)来完成荧光斑点观察的工作，对于在紫外光下有吸收的成分，可用带有荧光剂的薄层板(如硅胶 GF254 板)，在紫外光灯(254nm)下观察荧光板面上的荧光物质淬灭形成的斑点。
系统适用性试验
按各品种项下要求对实验条件进行系统适用性试验，即用供试品和标准物质对实验条件进行试验和调整，应符合规定的要求。
鉴别
鉴别的过程一般通过对比供试品色谱图中所显斑点的位置和颜色(或荧光)与标准物质色谱图的斑点一致性来实现，必要时化学药品可采用供试品溶液与标准溶液混合点样、展开，与标准物质相应斑点应为单一、紧密斑点。除此之外，还可以通过薄层色谱扫描仪进行扫描来实现鉴别、检查或含量测定的工作。具体来说即用一定波长的光照射在薄层板上，对薄层色谱中可吸收紫外光或可见光的斑点，或经激发后能发射出荧光的斑点进行扫描，然后将扫描得到的图谱及积分数据用于鉴别、检查或含量测定。
相关阅读 Related Reading
查看更多+-
项目名称：超高效半制备二维液相色谱仪，项目编号：0811-254DSITC1745，招标范围：超高效半制备二维液相色谱仪 壹套，招...2025-07-22 17:00:16
-
2025年第六批推荐性国家标准计划及相关标准外文版计划近日下达，本批计划包含多项涉及仪器设备及检测方法的国家标准，涉及仪器设备与通...2025-07-22 14:07:57
-
柞水县人民医院就“2025年组团式帮扶能力提升项目(设备部分)”发布招标公告，预算405.1万元。2025-07-22 13:55:32
-
近日，苏州高新区（虎丘区）疾病预防控制中心就“苏州高新区公共卫生中心实验室仪器设备采购-理化仪器设备”项目发布公开招标公告，预算金...2025-07-22 09:57:19
-
从中标数据来看，2025年6月国外品牌液相色谱仪的中标金额2094.898万元，远超国产品牌液相色谱仪中标金额235.2万元2025-07-18 11:10:03
版权与免责声明
- ①凡本网注明“来源：Ky开元集团”的所有作品，均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-Ky开元集团合法拥有版权或有权使用的作品，未经本网授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的，应在授权范围内使用，并注明“来源：Ky开元集团”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
- ②本网转载并注明自其他来源（非Ky开元集团）的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点和对其真实性负责，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品第一来源，并自负版权等法律责任。
- ③如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。
